遺伝子クローンとは、同一のDNA断片を持つプラスミドやファージ粒子のことです。ヒトゲノムDNAを細切りにしてそれらをファージベクターに挿入すれば、ヒトゲノムのライブラリーを作成することができます。 また、mRNAから逆転…

大腸菌の細胞内に、目的とするDNAを人為的に導入して形質転換しDNAクローニングやタンパク質発現を実行する技術は今なお重宝されています。そのDNAを大腸菌に導入するために運び屋（ベクター）として利用されるのが、プラスミド…

タンパク質は体の中で様々な役割を果たしています。例えば化学反応を触媒する酵素や筋肉の構成要素、抗体もタンパク分子です。こういったタンパク質の最小構成単位がアミノ酸です。 20種類の標準アミノ酸と呼ばれるものが直鎖状につな…

タンパク質を分離するのに用いられるクカラムロマトグラフィーですが、いくつかの手法が開発されています。今回はクロマトグラフィーの原理と、具体的な手法としてイオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、アフィ二テ…

遠心分離は、細胞液から取り出したいタンパクやDNA断片、プラスミドDNAなどを分画する方法として不可欠な実験法です。今回は遠心分離の理論と具体的な実験法について触れていきます。 理論 目的物を細胞から取り出してくるために…

電気泳動はタンパクやDNAを分離する手法としてよく用いられます。今回はその原理をはじめ具体的な電気泳動法について解説していきます。 電気泳動の原理 タンパク質や核酸などの生体分子は通常、電荷を帯びています。 溶液中のイオ…

私たちを形成する設計図の情報は、DNAという物質に書き込まれています。その構造とはいったいどのようなもので、どうのように情報として書き込まれているのでしょうか。 また、DNAは日本語でデオキシリボ核酸と呼ばれますが、核酸…

今回は競合阻害と不競合阻害の両方の形式をもつ混合阻害について、酵素反応の反応速度を導出しデータ解析手法を考えていきます。また、以下の記事をあらかじめ読んでおくと理解の助けになると思います。 反応速度 混合阻害剤を加えた時…

今回は不競合阻害（反競合阻害）を酵素反応系に加えた場合の反応速度式を導出していきます。競合阻害とは、酵素の基質結合部位に対して阻害剤が競合的に結合し酵素反応を阻害するものでした。 一方で今回扱う反競合阻害では、酵素だけの…

酵素や酵素-基質複合体に結合することで酵素の活性を下げる物質を阻害剤と呼びます。 阻害剤を利用した酵素の研究では、触媒機構の解明であったり阻害剤を利用した薬剤のデザインを試みることができます。 例えば抗がん剤の１つにメト…