第１世代塩基配列決定法 DNAの塩基配列決定法は、1975年にジデオキシ法（別名、サンガー法）、続いて1977年にマキサム・ギルバート法が発表されました。 いずれもポリアクリルアミドゲル電気泳動によってDNA断片の配列を…

ブロッティング解析とは、電気泳動により分離して得られたDNAやRNA、タンパク質をフィルターに写し取って解析する技術のことを指します。今回はブロッティング技術、サザンハイブリダイゼーション、ノーザンハイブリダイゼーション…

ハイブリダイゼーション 二本鎖DNAは熱を加えるかNAOHによるアルカリ処理によって、塩基対を形成する水素結合は切断され一本鎖に解離することができます。 また、ゆっくりと温度を戻すか中性条件にすれば互いに相補的な塩基対(…

遺伝子クローンとは、同一のDNA断片を持つプラスミドやファージ粒子のことです。ヒトゲノムDNAを細切りにしてそれらをファージベクターに挿入すれば、ヒトゲノムのライブラリーを作成することができます。 また、mRNAから逆転…

大腸菌の細胞内に、目的とするDNAを人為的に導入して形質転換しDNAクローニングやタンパク質発現を実行する技術は今なお重宝されています。そのDNAを大腸菌に導入するために運び屋（ベクター）として利用されるのが、プラスミド…

タンパク質は体の中で様々な役割を果たしています。例えば化学反応を触媒する酵素や筋肉の構成要素、抗体もタンパク分子です。こういったタンパク質の最小構成単位がアミノ酸です。 20種類の標準アミノ酸と呼ばれるものが直鎖状につな…

タンパク質を分離するのに用いられるクカラムロマトグラフィーですが、いくつかの手法が開発されています。今回はクロマトグラフィーの原理と、具体的な手法としてイオン交換クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、アフィ二テ…

遠心分離は、細胞液から取り出したいタンパクやDNA断片、プラスミドDNAなどを分画する方法として不可欠な実験法です。今回は遠心分離の理論と具体的な実験法について触れていきます。 理論 目的物を細胞から取り出してくるために…

電気泳動はタンパクやDNAを分離する手法としてよく用いられます。今回はその原理をはじめ具体的な電気泳動法について解説していきます。 電気泳動の原理 タンパク質や核酸などの生体分子は通常、電荷を帯びています。 溶液中のイオ…

私たちを形成する設計図の情報は、DNAという物質に書き込まれています。その構造とはいったいどのようなもので、どうのように情報として書き込まれているのでしょうか。 また、DNAは日本語でデオキシリボ核酸と呼ばれますが、核酸…